[观察叶片的结构实验]观察叶片的结构

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        叶的主要功能是进行光合作用和蒸腾作用。叶片的形状一般都是扁平的。从横切面观察，可见叶片是由上下表皮和叶肉构成的。叶片的上下表皮一般为一层细胞，中间的叶肉部分为多层细胞。双子叶植物的叶肉，其上半部为栅栏组织，下半部为海绵组织。栅栏组织细胞为长柱形，排列得较为紧密，细胞内的叶绿体较多。海绵组织由排列疏松、形状不规则的细胞所构成，细胞内叶绿体较少，细胞间有较大的间隙。这种叶肉组织上下有别的叶称为异面叶（或称两面叶）。禾谷类植物例如小麦的叶，其叶肉组织上下相同，称为等面叶。

 一、实验准备

 （一）材料：蚕豆叶。

 （二）用品：显微镜、载玻片、盖玻片、刀片、镊子、培养皿、清水、滴瓶、体积分数为70％的酒精。

 二、方法步骤

 （一）蚕豆页片的内部结构 取蚕豆叶，做徒手切片（可用夹持物或不用夹持物）。如不用夹持物，可按下述方法操作。返回页首

将蚕豆叶切成0．5cm左右宽的窄条，将窄条置于载玻片上（可将两三片窄条握在一起），用左手食指尖压紧叶片窄条，右手拇和食指捏着刀片，紧贴左手食指指尖向下拉切，如此多切几刀，选择其中理想的材料封片观察。

在低倍镜下可以看到叶片背、腹两面的最外层为上、下表皮，其细胞排列紧密，外表面具有一层透明的角质层（上表皮的角质层更为明显）。调节显微镜的焦距，在上下表皮上都可以观察到气孔（可以见到保卫细胞的横切面，其细胞稍小于表皮细胞），并且下表皮上的气孔多于上表皮上的。蚕豆叶是异面叶，其叶肉有明显的栅栏组织和海绵组织。紧靠上表皮的栅栏组织是由一至两层形似栅栏的、长柱状的细胞组成的（有些双子叶植物的栅栏组织为一层细胞）。

栅栏组织的细胞内含有大量的叶绿体。如果切片较厚，有可能看不清细胞轮廓。可将切片置于体积分数为70％的酒精中，浸泡数分钟，溶出叶绿体中的部分叶绿素，使叶肉颜色变浅，再封好切片，放在低倍镜下观察，这样可以比较清楚地分辨出细胞的界限。紧靠下表皮的海绵组织是由几层不规则的细胞所组成，细胞间具有较大的细胞间隙，以利于通气。海绵组织细胞内的叶绿体较少。在叶肉内还可以观察到无色的维管束（叶脉）。如果观察到导管的纵切面（因为叶脉呈网状，切片内常有导管的纵横两种切面），可以看到导管上的纹饰。叶脉中的木质部位于叶脉的上方，而韧皮部则位于叶脉的下方。由于韧皮部主要是由薄壁细胞组成的，所以不如导管形态明显。用低倍镜观察后，可以换高倍镜观察叶片表皮中气孔周围保卫细胞的横切面。双子叶植物叶片的下表皮含有的气孔较多。

（二）蚕豆叶表皮的表面观察

按照洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片的制片方法，撕取蚕豆叶下表皮，并制片观察。在低倍显微镜下，可见下表皮相邻细胞的边缘呈波纹状，彼此镶嵌。观察完表皮细胞后，找到气孔器。换高倍显微镜仔细观察气孔器，可以见到它是由两个半月形的细胞和中央的气孔构成的。保卫细胞内具有叶绿体，仔细调节显微镜的焦距，可以观察到细胞核。

三、教学建议

（一）做叶片徒手切片的方法很多，除教材上提供的双刀片并排切片法以外，本实验所用左手食指尖压紧叶片，右手持刀沿左手指甲切片的方法，也可将切片切得很薄。但是，在实验前一定要向学生讲清楚切片的要领，主要是左手食指的指甲朝下，尽可能与载玻片垂直，这样不仅能切得薄，而且也避免切伤手指。12

（二）制片时盖玻片一定要注意轻放，以便保持叶片横切面的位置不变。这样在调节焦距后，就可以分辩出栅栏组织和海绵组织。

（三）本实验采用蚕豆叶片作为实验材料，是因为蚕豆叶片在不同的季节都较容易得到。如果季节合适，也可以组织学生采集校园中其他的双子叶植物叶片进行实验，但一定要采用一般的阳生叶。另外，要向学生讲清楚，虽然都是双子叶植物的叶片，但是其栅栏组织的细胞层次可能不同，最好教师多采集一些植物叶，预先观察一下。

 （四）撕取叶片表皮时，除按照教材中撕取洋葱鳞片叶表皮的方法进行撕取外，也可以直接用手猛力撕取叶片的下表皮，扯开的叶片破损边缘处，就有一部分很薄的透明的下表皮，可以切下来使用。无论采用哪种方法撕取，教师都要预先撕取，这样才能指导学生撕好叶片的表皮。12

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